Méthodes de test :
Tests d’activité métabolique des mycoplasmes :
Détectez la contamination en mesurant les changements dans le métabolisme. Ces méthodes sont rapides et sensibles, adaptées aux tests de routine.
Méthodes de détection de l’ADN mycoplasmique :
Utilisez la réaction en chaîne par polymérase quantitative (qPCR) pour amplifier et détecter l’ADN des mycoplasmes, offrant une spécificité et une sensibilité élevées.
Protéines de cellules hôtes (HCP)
Les protéines de cellules hôtes (HCP) sont des protéines produites par des organismes hôtes (par exemple E. coli, levure, cellules CHO) lors de la production de produits biopharmaceutiques. La contamination par HCP peut nuire à la qualité du produit.
Méthode de détection :
Test immunoenzymatique (ELISA) :
Utilise des anticorps spécifiques pour détecter et quantifier les HCP. Cette méthode offre une spécificité et une sensibilité élevées, garantissant une gestion efficace de la contamination par HCP grâce au développement du processus, à la validation et aux tests de
libération des lots.
ADN et ARN résiduels des cellules hôtes
La contamination résiduelle de l’ADN et de l’ARN des cellules hôtes constitue une préoccupation majeure dans la production biopharmaceutique. Ces contaminants peuvent déclencher des réponses immunogènes, des réactions inflammatoires ou le développement d'anticorps contre le produit thérapeutique.
Méthode de détection :
Réaction en chaîne par polymérase quantitative en temps réel (RT-qPCR) :
Détecte et quantifie des traces d’ADN et d’ARN de cellules hôtes à l’aide d'amorces et de sondes spécifiques, garantissant ainsi la sécurité et l'efficacité du produit.
Protéine A résiduelle
La protéine A est utilisée dans la purification des anticorps monoclonaux et sa présence résiduelle dans le produit final peut présenter des risques importants, notamment des réponses immunogènes.
Méthode de détection :
Test immunoenzymatique (ELISA) :
Utilise des anticorps pour détecter et quantifier la protéine A résiduelle, garantissant ainsi une sensibilité et une précision élevées.
Contamination par la DNase et la RNase
La contamination par la DNase et la RNase peut dégrader l’ADN et l’ARN des produits biopharmaceutiques, entraînant une perte d'efficacité et des réponses immunogènes potentielles.
Méthodes de détection :
Test de détection de la fluorescence ou de l’absorbance :
Quantifie l’activité enzymatique lorsque les DNases et les RNases dégradent les substrats d’ADN ou d’ARN, fournissant ainsi des mesures précises de contamination.
Impuretés liées au processus
Les impuretés liées au processus proviennent de diverses sources au sein du processus de production, ayant un impact sur la qualité, la sécurité et l'efficacité des produits pharmaceutiques.
Sources et exemples :
Composantes des médias culturels :
Albumine sérique bovine (BSA)
Albumine sérique humaine (HSA)
Insuline
Transferrine bovine
Transferrine humaine
Enzymes de biotraitement :
Benzonase
Nucléase®
Dénarase®
Ligands résiduels :
IgG de chèvre résiduelles et IgG bovines provenant de résines de chromatographie d’affinité
Une surveillance et un contrôle minutieux de ces impuretés tout au long du processus de production sont essentiels pour garantir la sécurité et l’efficacité du produit pharmaceutique final.
